Руководство к практическим занятиям по цитологии. Владимир Коничев

Чтение книги онлайн.

СКАЧАТЬ на дом для самостоятельной работы. Выполняется письменно в тетради в виде конспекта учебника. Тема: «Основы микроскопической техники».

Вопросы для самостоятельной работы

      1. Что такое микроскопическая техника?

      2. Что такое фиксация и для чего она используется? Примеры фиксаторов.

      3. Перечислить основные этапы приготовления постоянных препаратов

      4. Что такое артефакт?

Литература

      1. Верещагина В. А. Основы общей цитологии. – М.: Академия, 2007.

      2. Стволинская Н. С. Цитология. – М.: Прометей, 2012.

      3. Ченцов Ю. С. Цитология с элементами целлюлярной патологии. – М.: Медицинское информационное агентство, 2010.

      Занятие № 2

      Опрос по предыдущей теме: история цитологии, клеточная теория, клетки прокариот и эукариот, растений и животных, микроскопическая техника, клеточный цикл, стволовые клетки.

      Тема занятия: «Изучение клеток с помощью световой микроскопии и специфических методов окрашивания».

      Цель занятия:

      1. Ознакомить студентов с методами цитохимии.

      2. С помощью световой микроскопии изучить препараты, окрашенные на жир и гликоген.

Объяснение преподавателяСпецифические методы окрашивания, или цитохимия

      Цитохимия – это область цитологии, которая изучает содержание и распределение химических соединений внутри клетки, а также динамику их превращений в процессе жизнедеятельности.

      Методы цитохимии подразделяются на две большие категории. К первой группе относятся методы, основанные на использовании специфических красителей, взаимодействующих с конкретными химическими соединениями, образуя прочные химические связи. Например, при окрашивании суданом черным в клетках выявляются жиры в виде черных капель, структуры ядра и цитоплазмы остаются бесцветными.

      Вторая группа методов цитохимии основана на проведении химической реакции непосредственно на срезе на предметном стекле. Реакция проводится таким образом, чтобы гидролизовать изучаемое химическое соединение, но при этом должны образоваться специфические реакционные группы, способные взаимодействовать с определенным красителем. Условия гидролиза для каждого соединения подбираются индивидуально. Например, обесцвеченное основание фуксина, взаимодействуя с альдегидными группами, образует прочное соединение, которое в присутствии сернистой кислоты окрашивается в красный цвет. Это свойство обесцвеченного основания фуксина используется для специфического окрашивания гликогена или ДНК в клетках, но гидролиз проводится так, чтобы именно на ДНК или на гликогене образовались свободные альдегидные группы. Для выявления ДНК гидролиз проводится при нагревании в соляной кислоте. При окрашивании на гликоген реакцию проводят при комнатной температуре в растворе СКАЧАТЬ