Микробиология с основами эпидемиологии и методами микробиологических исследований. Виктор Сбойчаков

Чтение книги онлайн.

СКАЧАТЬ биохимической идентификации микроорганизмов выпускаются коммерческие микротест-системы. Они представлены двумя группами, различающимися особенностями содержания субстрата реакции: 1) в питательной среде; 2) в шаблоне-носителе. Тест-системы первой группы содержат в микрообъемных лунках полистироловых пластин дегидрированные питательные среды, стабилизированные поливиниловым спиртом, например, API-20E, Enterotest 1 и 2, отечественные ПБДЕ и MMTE 1иЕ2.Тест-системы второй группы имеют субстрат и индикатор в бумажном или полимерном шаблоне-носителе, например, Micro-ID, Minitek.

      Разработаны также тест-системы на основе жидких дифференциальных сред, которые можно изготавливать непосредственно в лабораториях. По результатам биохимических тестов устанавливается вид микроорганизма с помощью таблиц идентификации, аналитического каталога кодов или приборов автоматизированных микробиологических систем биохимической идентификации микроорганизмов. Ввиду ускорения исследования и высокой экономичности микрообъемные тест-системы находят широкое применение в работе лабораторий.

      Для натуральных питательных сред используют животные, растительные и микробные продукты: мясо, рыбную муку, молоко, яйца, кровь, картофель, дрожжи и др. Из них готовят полуфабрикаты: настои и экстракты (мясная вода, дрожжевой экстракт), ферментативные и кислотные гидролизаты (пептон, перевар Хоттингера, перевар казеина и др.). Настои и экстракты являются источником факторов роста, гидролизаты – источником аминокислот и других органических питательных веществ.

      В качестве уплотнителя питательных сред применяют агар-агар или желатин. Агар-агар – полисахарид, получаемый из морских водорослей. Он способен образовывать в воде гель, плавящийся при температуре 80 – 86 °C и застудневающий при температуре 40 – 45 °C; не расщепляется большинством микроорганизмов. Желатин – белок, получаемый из кожи и костей; желатиновый гель плавится при температуре 32 – 34 °C, застывает при 26 – 28 °C (т. е. при температуре инкубации 37 °C находится в жидком состоянии); расщепляется многими видами микроорганизмов. Поэтому желатин применяют редко.

      При необходимости осветляют питательную среду, обрабатывая ее белком куриного яйца, сывороткой или путем осаждения. Разливают среду в колбы, флаконы, пробирки. Если среда подлежит стерилизации при температуре 120 °C, используют чистую нестерильную посуду, а если среда требует стерилизации текучим паром (100 °C) или при температуре 112 °C – стерильную. Закрывают посуду со средой ватномарлевыми пробками с бумажными колпачками. В зависимости от состава среды стерилизуют различными способами. Агаровые среды, не содержащие углеводов и нативного белка, а также синтетические среды стерилизуют в автоклаве при температуре 115 – 120 °C в течение 15 – 20 мин. Среды, содержащие углеводы, молоко, желатин, стерилизуют текучим паром (100 °C) дробно или в автоклаве при температуре 112 °C в течение 15 мин. Среды, содержащие нативный белок, мочевину, стерилизуют фильтрованием или добавляют стерильные СКАЧАТЬ